Leche y productos lácteos – Leche - Determinación del contenido de lactosa. Método Gravimétrico - Part 2

4 REACTIVOS 

4.1 Solución de sulfato de cobre (Fehling I).
Disolver 34,639 g de CuSO4 x 5H2O en agua destilada, diluir a 500 ml en matraz aforado, y filtrar a través de un papel filtro.
4.2 Solución de tartrato alcalino (Fehling II).
Disolver 173 g de KNa tartrato x 4H2O y 50 g de NaOH en agua destilada: diluir a 500 ml
en matraz aforado. Dejar en reposo durante dos días y filtrar a través de papel filtro.
4.3 Solución de hidróxido de potasio.
4.4 Alcohol.
4.5 Eter.

5 PROCEDIMIENTO 

5.1 Disolver 1,6 g de suero en polvo, 2.0 g de leche descremada ó 2.8 g de leche entera en 400 ml de agua a 60ºC en un matraz aforado de 500 ml. Cuando la muestra esté  disuelta, enfriarla a 20ºC. 

5.2 Añadir 10 ml de solución de Fehling I y aproximadamente 7 ml de solución de KOH. La  solución debe ser ácida y contener cobre en solución. Diluir hasta el aforo, mezclar y 

filtrar a través de un filtro seco. 

5.3 Transferir con pipeta de 25 ml de solución Fehling I y 25 ml de Fehling II a un vaso de  precipitado de 400 ml. 

5.4 Añadir 25 ml de solución del filtrado de azúcar y reductor y 25 ml de agua. 

5.5 Cubrir el vaso de precipitado con un vidrio de reloj y calentar con mechero Bunsen bajo  rejilla de asbesto. Regular la llama de modo que la ebullición comience a los 4 minutos  y continúe hirviendo durante 2 minutos. Es importante observar estrictamente estas  condiciones. 

Para regular el mechero es conveniente realizar pruebas preliminares usando 50 ml de  agua y 50 ml de reactivo. 

5.6 Filtrar rápidamente la solución caliente a través del filtro de vidrio, previamente seco y  pesado, usando vacío. 

5.7 Transferir todo el precipitado de Cu2O al filtro, lavar con agua a 60ºC, luego con 10 ml 

de alcohol y finalmente con 10 ml de éter. 

5.8 Seca el precipitado en el horno a 100ºC durante 30 minutos. Enfriar y pesar. 

5.9 Realizar ensayos en blanco de acuerdo con los puntos 6.3 a 6.8 utilizando agua en  lugar de solución de filtrado de azúcar reductor. Si el peso de Cu2O obtenido es  superior a 0,5 mg corregir los resultados de la determinación de azúcar reductor.